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rtqpcr原理及应用
1、qpcr原理：通过凝胶电泳、毛细管电泳等方法对产物进行检测。qpcr应用于大学及研究所、CDC、检验检疫局、兽医站、食品企业及乳品厂等。qpcr是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应循环后产物总量的方法。
2、在研究实验室中，qPCR 测定广泛用于定量测量转化细胞系中的基因拷贝数（基因剂量）或突变基因的存在。
3、qRT-PCR原理 以基因的cDNA为模板进行PCR扩增，在PCR扩增过程中，通过收集荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以可以定量。
4、RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。
浅谈RT-PCR、qRT-PCR原理
一步法RT-qPCR把逆转录与PCR扩增结合在一起，使逆转录酶与DNA聚合酶在同一管内同样缓冲液条件下完成反应。一步法RT-qPCR只需要利用序列特异性引物。
qRT-PCR技术的原理是以荧光分子为探针，荧光分子会跟随或结合到目标DNA或RNA分子中，并发出明亮的信号作为检测结果。该技术通过扫描每个PCR循环和试管中的荧光信号，确定了DNA和RNA的具体存在量。
原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。
rt-pcr原理如下：只要是利用相关技术提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。
PCR,RT-PCR,实时荧光定量PCR的区别与联系
所说的PCR应该就是最常规的PCR，以DNA为模板，通过上下游引物，实现DNA的扩增。
PCR：一种快速的DNA复制方法，由变性--退火（复性）--延伸三个基本反应步骤构成。RT-PCR：反转录PCR（reverse transcription-PCR），是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。
普通RT-PCR是半定量的。即需要从条带的亮度判断量的相对多少。荧光定量PCR是定量的。因为两者反应体系，要求有很大区别，引物通常不能通用。除了上面提到的荧光定量PCR产物要控制在60-200nt之间，退火温度也比较高。
RT-PCR和一般的PCR相比原理上没有太多的区别，无非就是在反转时候RNA的定量，不同模板的设定。对引物没有特别的要求，能特异代表目的基因就行。real-time PCR根据原理的不同，引物选择也不同。
荧光定量PCR（real-time RT-PCR）可以实时监测PCR的扩增过程，通过达到某个荧光阈值的循环数来反映模板（mRNA）的含量，这种方式比终点法的定量更具有准确度度。
time）。qRT-PCR是最合理的写法，也就是把RT-PCR（反转录PCR）+qPCR（定量PCR）=qRT-PCR，或者写成RT-qPCR。如果你做的是荧光定量，还可以写成RT-fq-PCR（f代表荧光）。
