蛋白酶K吗?在55-65度的条件下活性最高。
蛋白酶K的最佳反应温度为65℃,但在65℃或更高的温度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性。
所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/lCa2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入egt(ph0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合Ca2+。
不同酶的最适pH范围不同,偏酸性、中性、偏碱性的都有。比如根据作用最适pH值,常把蛋白酶分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。酶作用pH值也是一定条件下,测得的参数。温度或底物不同,酶作用的最适pH不同,温度越高,酶作用的稳定pH范围越窄。
DNA连接酶在25℃时具有最佳活性,因此连接反应在使DNA末端连接在一起的最佳温度(1℃)和酶反应(25℃)之间的权衡温度下进行。通常在16℃下1小时是可以的,但是由于将DNA末端连接在一起是反应中最不有效的部分,因此通过将温度降低到4℃来促进这一点可以提供更高的效率。
浓度:20mg/mlDNase,RNase:None detected性状:液体,是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的 丝氨酸蛋白酶 ,来源于 白色念球菌 (.Tritirachium album.),具有很高的 比活性 。
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。
在RNA提取中,蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶,防止RNA的降解。
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从林伯氏白色念球菌中纯化得到。该酶有两个Ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去Ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酶制品的蛋白质。
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。据资料显示:该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。
Proteinase K,中文名为蛋白酶K。不含DNase,不含RNase,进口分装,可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。酶活力,30U/mg。
在RNA提取中,蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶,防止RNA的降解。
蛋白酶K的作用是使膜蛋白降解,使与DNA结合的蛋白质降解,使DNA充分游离。RNase A的作用是使RNA降解,减少提取得到的DNA中的RNA,以便减少对后续实验的影响。
蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。