1、细胞培养基里面通常添加酚红作为pH的指示剂,中性条件下,培养基为红色,如果偏酸,培养基会变黄,如果偏碱,培养基颜色会变紫。
2、甲基红是一种酸碱指示剂,它在pH5以下显示红色,pH5到2是橙色,pH2以上是黄色。甲基红试验就是根据大肠杆菌分解产生的酸量比较多,产气大肠杆菌产酸量比较少,来鉴别两种菌的。
3、有可能是二氧化碳缓冲的,培养基PH值的变化会造成培养基颜色的变化,有些细胞的培养基也会变黄。血清浓度:大于15%培养液即偏黄。如果怀疑污染,最可能的是支原体,一般在培养两周左右细胞基本全部死亡。
消化细胞的胰酶中的酚红的作用其实主要是起到PH指示剂的作用,还可以模拟一些激素的作用。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。
浓度不同。根据查询上海雅酶生物医药科技有限公司显示,含酚红,含5克每升胰酶(1比250)溶于含酚红溶液,百分之0.02乙二胺四乙酸溶含酚红溶液,不含钙、镁。百分之0.25胰酶不含酚红,含5胰酶(1比250)溶于HBSS溶液,不含钙镁。
首先,理解传代培养的概念。传代培养即从原培养物中移除细胞,转移到新的生长培养基中,以促进细胞进一步繁殖。这一过程受细胞增殖特性的影响,大致可分为三个阶段:延迟期、指数期和平台期。
完全培养基中各物质的作用:双抗(Penicillin-Streptomycin Solution)预防微生物污染;L-谷氨酰胺提供能量来源和参与蛋白质、核酸代谢;GLutaMAX稳定L-谷氨酰胺,防止降解和氨积累;丙酮酸钠作为碳源替代;HEPES在37℃下维持pH2-4的稳定环境;酚红作为pH值指示剂,监测培养液酸碱度。
培养液:1:1 混合的DMEM / F12 培养液,添加终浓度为10%小牛血清(FCS)、100IU/ml 青霉素、100μg/ml 链霉素。消化液:胰酶(效价为1:250) 0.08%、胶原酶II(活力为150U/mg) 0.05% ,用pH 2-8 的D-Hanks溶液配制,-20 ℃保存。
没有酚红指示剂吗?用NaHCO3或NaOH调制深红色就可以了。紫红色就有点过了,但细胞皮实也问题不大。
1、培养基斜面仍然呈红色是添加了酚红指示剂。根据查询相关资料信息,细胞培养基中添加了含色素的染料,便于在培养时观察。
2、细胞生长繁殖消耗培养液的营养物质。因为细胞生长繁殖消耗培养液的营养物质,分泌代谢产物,所以导致细胞培养液变红的。斜面培养基是固体培养基的一种形式。制作时应趁热定量分装于试管内,并凝固成斜面的称为斜面培养基,用于菌种扩大转管及菌种保。
3、三糖铁实验原理是如果细菌可利用乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气,培养基全部变黄;如果只可以利用葡萄糖,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面最后为红色,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,仍保持黄色。
溶液的配制方法:取0.1 g苯酚红与7 mL 0.05 mol/L的NaOH溶液在研钵中研匀;用纯水溶解制成250 mL试液。酚红的作用: 酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,但是酚红具有一定的固醇类激素样作用,如雌激素样作用,尤其对于所培养的哺乳类动物细胞,可能发生的固醇类反应不可忽视。
在实验中,酚红被加入到培养基中,以帮助研究人员了解肠道内的pH环境。当肠道内的pH值为中性时,酚红显示为红色;当肠道内的pH值酸性增加时,酚红变为黄色;而在肠道内pH值碱性增加时,酚红会变为紫色。因此,通过观察酚红颜色的变化,可以帮助研究人员了解肠道内环境以及小肠对物质的吸收情况。
非必需氨基酸作为辅助成分,它们如同细胞的营养补剂,不仅刺激细胞的增殖,还能减轻氨基酸缺乏可能带来的负面影响。然而,抗生素的加入虽能有效防止污染,但在干细胞培养中却需谨慎,因为它们可能引发耐药性并干扰细胞代谢。
首先,解释了为什么DMEM培养基是鲜红色。这源于培养基中添加了酚红,酚红指示pH值变化,范围为6-8,颜色由黄变为紫红。这一颜色变化有助于直观判断培养液的酸碱性,方便观察细胞培养状态。接着,解答了为何在没有开启CO2的孵箱中,培养液颜色会偏紫色。
准备几种培养基,然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验,来选择其中最适合的。以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。
基础培养基可以分为含有血清和无血清两种类型。含血清培养基具有成分比较复杂,对细胞生长的促进作用比较明显,但是有可能带来病毒和其他病原微生物,导致不同程度的污染。而无血清培养基则具有成分比较单纯、无病原微生物污染、细胞可重复使用等优点,是现代生物技术研究领域中应用最为广泛的一类培养基。
根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选RPMI1640 。(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
高品质的细胞培养基需满足以下要求:外观 颜色均匀,粉末细度一致。溶解性 培养基完全溶解,避免营养成分流失。pH值 确保细胞生长所需的合适酸碱度。水分 控制营养成分含量,延长有效期。冰点渗透压 保持细胞生存所需的渗透压。菌落总数 控制微生物滋生,延长有效期。