聚丙烯酰胺:对眼睛和皮肤有毒性:当计划的一个实验涉及放射性物质的使用时,N’-亚甲基丙烯酰胺:有腐蚀性。避免吸入蒸汽、眼睛和皮肤有极大的破坏性。 (57)硫酸镁,摄入,在通风橱内操作,皮肤吸收可造成损伤,丢弃被污染的衣物。
N,N’-亚甲基丙烯酰胺:为毒药,作用于中枢神经系统。吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤。有刺激性。戴好手套和护目镜。(103)亚精胺:有腐蚀性。吸入,摄入,皮肤吸收可造成损伤。有刺激性。戴好手套和护目镜。在通风橱内操作。
三氨基丙基甲基丙烯酰胺是有毒的,对人体的危害主要表现为具有潜在的神经毒性、遗传毒性、生殖毒性和致癌性,丙烯酰胺可通过未破损的皮肤、粘膜、肺、消化道吸收进入人体,分布于体液中。
.制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)o在水溶液中用催化剂引发聚合。
SDS-PAGE凝胶电泳原理是聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺在催化剂过硫酸铵,N,N,N’,N’四甲基乙二胺作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。
聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。
1、胶板准备(1)胶板的清洁是灌胶能否成功的第一关键步骤。反复使用时要将玻璃板和间隔片上凝胶去除干净,彻底洗净后干燥。用乙醇擦拭玻璃板上残留水渍。不能有一点残留的凝胶和残渣,否则灌胶时会产生气泡。
2、制备聚丙烯酰胺凝胶时加水是为了让下层胶平整,防止胶氧化。
3、化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。
4、凝胶的制备:凝胶由分离胶和浓缩胶组成:上层为浓缩胶,凝胶孔径较大,没有分子筛效应,其pH为8,由于快慢离子所形成的高电压梯度,使得变性蛋白质分子在泳动中被压缩为很薄的一层,大大提高了分辨率。