您关心的流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI),来了!
1、为进行细胞凋亡的FITC-PI检测，首先收集要用于细胞凋亡检测的细胞，离心并去除培养基。然后，用PBS洗涤细胞一次，重悬于1×Binding Buffer中。对于对照组，使用400μL的1×Binding Buffer，其他处理组则使用100μL的1×Binding Buffer。
2、流式Annexin-FITC /PI双染法是一种常用的检测细胞凋亡的方法。在流式细胞术中，通过Annexin-FITC和PI对细胞进行染色，可以将细胞分为几个不同的象限，每个象限代表了细胞的不同状态。左下象限通常表示的是正常状态的细胞，这些细胞既不表达Annexin-FITC也不表达PI，表明它们没有经历凋亡过程。
3、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是经典的细胞凋亡检测方法，基于凋亡早期细胞膜上磷脂酰丝氨酸（PS）从内侧翻转到表面这一原理。Annexin V-FITC标记有助于识别早期凋亡细胞，而PI-DNA复合物可用于检测所有阶段的细胞死亡。
4、annexin FITC/PI 双染试剂盒在染色时确实需要使用专门的buffer来稀释染色试剂，而不是直接使用PBS。因此，在进行染色之前，应当先对PBS进行离心处理，去除其中的杂质，然后再加入用buffer稀释的染色试剂，随后进行上机检测。
【求助】流式细胞仪检测细胞凋亡结果该怎样分析
在进行流式细胞仪检测细胞凋亡时，我遇到了一些困惑。我使用的是AnnexinV-FITC凋亡试剂盒，采用AnnexinV/PI双染方法检测细胞凋亡。然而，当我得到凋亡散点图后，发现关于1，2，4象限代表的细胞类型说法不一。
手里的资料说法都不相同。试剂盒说明书：1代表细胞收集过程中机械性损伤的细胞，2 代表继发性坏死细胞，4代表凋亡细胞。有资料说：1代表坏死细胞，2代表晚期凋亡细胞，4代表早期凋亡细胞。我就不明白了，既然是凋亡，就算是晚期，细胞膜也会破坏？还有的认为，2象限代表晚期凋亡和继发性坏死的细胞。
细胞碎片较多：碎片增多可能源于细胞固定或渗透性处理不当，影响实验准确性。调整固定时间与渗透条件，确保细胞结构完整。0正常组阳性率异常：正常组阳性率过高可能由背景荧光过高、染色剂浓度不适当或样本处理不当引起。调整染色剂浓度，控制样本处理过程，减少背景干扰。
进行流式检测细胞凋亡时，首先需要收集细胞样本并制备细胞悬液。然后，进行Annexin V-FITC和PI的双染色，根据荧光信号在流式细胞仪上的分布情况，识别和区分不同状态的细胞。数据分析 流式细胞仪收集的数据通过专门的软件进行分析，生成双色散点图，直观显示细胞在不同状态下的分布。
一般都是计数一个固定值，比如10000，然后得到每个GATE里面的比率。对比比率。每组多做几个样本。组间比例对比可以用T test。
需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂，在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。
如何用流式检测细胞凋亡
1、细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此，具有其它方法无可比拟的优越性。为您介绍流式在检测凋亡方面的应用。
2、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是经典的细胞凋亡检测方法，基于凋亡早期细胞膜上磷脂酰丝氨酸（PS）从内侧翻转到表面这一原理。Annexin V-FITC标记有助于识别早期凋亡细胞，而PI-DNA复合物可用于检测所有阶段的细胞死亡。
3、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine， PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。
4、**过滤**：使用400目筛网过滤一次，再次离心，去除多余PBS。 **染色**：加入PI染液，于4℃下避光染色30分钟。 **检测**：使用流式细胞仪检测，分析PI荧光强度的直方图以及前散射光与侧散射光的散点图。
索莱宝细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒的说明书有吗
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒（Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit）是一种采用经典的碘化丙啶染色（Propidium staining，即PI staining）方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。 碘化丙啶（Propidium，简称PI）是一种双链DNA的荧光染料。
...待检细胞要去做流式,测凋亡,应该用什么凋亡试剂盒呢?
1、转染了GFP的细胞不能用FITC标记的Annexin V，因为FITC和GFP在流式细胞仪上是同一通道检测，无法区分，必须选用其他荧光素标记的Annexin V，比如APC、PE等。BD的凋亡检测试剂盒不错。
2、在进行流式细胞仪检测细胞凋亡时，我遇到了一些困惑。我使用的是AnnexinV-FITC凋亡试剂盒，采用AnnexinV/PI双染方法检测细胞凋亡。然而，当我得到凋亡散点图后，发现关于1，2，4象限代表的细胞类型说法不一。
3、为进行细胞凋亡的FITC-PI检测，首先收集要用于细胞凋亡检测的细胞，离心并去除培养基。然后，用PBS洗涤细胞一次，重悬于1×Binding Buffer中。对于对照组，使用400μL的1×Binding Buffer，其他处理组则使用100μL的1×Binding Buffer。
4、因此，常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外，还会加一种DNA染料，常用的有PI和7-AAD，由于死亡的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和DNA结合，从而可以发荧光，区分出死细胞。在采用Annixin V方法检测凋亡细胞时，要特别强调一点：该方法适用于悬浮生长的细胞，如：淋巴细胞等细胞的检测。
5、流式检测细胞凋亡的原理 Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法 ，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine， PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的（如下图3）。
6、该试剂盒只能检测活细胞，而不能用于切片、擦刮、固定或浸润细胞样品的检 测。如需对活细胞固定进行其它检测，可在本试剂盒标记完成后，用Annexin V结合缓冲液清洗细胞，再固定进行后续操作。2） 细胞凋亡是一种持续变化的动态过程，选择合适的诱导时间对观察凋亡比较重要。