乙酰甲基甲醇配方（乙酰甲基甲醇生成试验）

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V-P（乙酰甲基甲醇试验）和MR（甲基红）试验是鉴定细菌常用的生理生化反应试验，目的是检验某些细菌利用葡萄糖的能力。

乙酰甲基甲醇生成试验（V—P试验）：细菌发酵葡萄糖生成丙酮酸，某些细菌可使丙酮酸脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性溶液中，乙酰甲基甲醇可在空气中氧化成二乙酰（丁二酮）。

乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被空气中的氧气氧化成二乙酰，二乙酰与蛋白胨中精氨酸等胍基化合物的胍基起作用，生成红色化合物，此反应为乙酰甲基甲醇的阳性反应，没有红色化合物产生则为阴性反应。

V-P试验用于检测细菌能否利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力。

某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧，氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。

V-P试验的原理是某些微生物能将葡萄糖分解为丙酮酸，丙酮酸缩合、脱酸转变为乙酰甲基甲醇，在强酸下后者与氧产生二乙酰，二乙酰与蛋白质中的含胍基成分作用生成红色化合物，即为V-P试验阳性。

1、提取含杂质较少的dna。用预冷的95%的酒精。因其①可抑制核酸水解酶活性，防止降解。②降低分子运动，易析出沉淀。③低温利于增加dna柔韧性，减少断裂 3．dna鉴定。用二苯胺在沸水浴中与dna作用出现蓝色。

2、不同细菌生化鉴定管的操作要求是不同的，有的生化鉴定管需要把菌液调整到一定浓度之后再进行接种，接种的液体量也有要求，而有的生化鉴定管只需要穿刺接种就可以。所以这是不能一概而论的，应该按照说明书来操作。

3、酵母菌和霉菌等；具有很高的特异性。缺点：生化反应鉴定方法需要进行一系列的生化反应实验，实验操作相对繁琐需要专业技术人员进行操作；需要进行多个实验，每个实验都需要一定的时间才能完成，因此需要较长的实验周期。

4、挑取单菌落液体培养，鉴定。鉴定：首先要判断你的菌种需要在什么条件下生长，厌氧还是需氧等等，然后选择合适的培养基进行分离培养（如果细菌含量少，那么还需要增菌）。

V－P试验，又名乙酰甲基甲醇试验，伏普反应。

V-P（乙酰甲基甲醇试验）和MR（甲基红）试验是鉴定细菌常用的生理生化反应试验，目的是检验某些细菌利用葡萄糖的能力。

结合，通常在10min内形成红色化合物。若不显色，放置于50℃水浴2h，或放置于37℃培养箱中4h，充分摇动，观察培养液反应结果，不显红色为阴性，阴性对照菌是大肠埃希氏菌。

我们的大肠杆菌颜色几乎没变，枯草芽孢杆菌变红，而且二者的溶液都很混浊。如果颜色很红的话，可能是二乙酰和胍基多吧，不知道你有没有加入肌酸，肌酸能够提供更多的胍基，不知道是否会造成误差。

在革兰氏染色中，枯草杆菌是革兰氏阳性菌，被染成紫（或紫红色）。而大肠杆菌是革兰氏阴性菌，被染成红色。

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