cas9基因编辑原理
1、cas9基因编辑原理：将CRISPR/Cas系统嵌入到基因组中，使CRISPR核酸和Cas蛋白能够结合到特定的DNA序列上，从而实现基因编辑的目的。CRISPR-Cas9，一种基因治疗法，这种方法能够通过DNA剪接技术治疗多种疾病。2017年3月，英国《自然·通讯》杂志发表一项遗传学重要研究成果，利用CRISPR-Cas9系统可拯救失明小鼠。
2、它可以是基因敲除，通过DSB引发NHEJ修复导致基因失活，或者通过Cas9 nickase提高编辑的特异性。基因敲入则利用HDR修复技术导入目标基因，尽管成功率相对较低，但通过优化策略可以提高效率。此外，dCas9通过靶向结合，调控基因转录，实现基因表达的激活或抑制，提供了一种可逆的基因调控手段。
3、就像文本编辑工具一样，CRISPR/Cas9能够通过“剪切和粘贴”脱氧核糖核酸（DNA）序列的机制来编辑基因组。这套系统源自细菌的防御机制，是一种对任何生物基因组均有效的基因编辑工具。报道称，CRISPR/Cas9系统是原核生物（细菌和古细菌等）拥有的一种防御机制。
4、CRISPR/Cas9技术是一种新型的基因编辑工具，其原理基于细菌和古细菌的免疫防御机制。Cas9蛋白是一种RNA引导的核酸酶，通过与CRISPR RNA（crRNA）和转录激活RNA（tracrRNA）结合，形成复合物，能识别并切割特定DNA序列，产生双链断裂（DSB），进而进行基因编辑。
大家cas9敲除细胞基因,转染cas9后要不要
1、有人用CRISPR/Cas9系统做细胞基因敲除 是的，确切来说是大量表达。 大肠杆菌是基因重组技术中常用的细菌，将外源目的基因（如人胰岛素基因）导入大肠杆菌后可在大肠杆菌内表达目的蛋白（如胰岛素），由于细菌繁殖速度快，通过发酵便可在短时间内获得大量胰岛素，再经多步分离、纯化便得到了药用胰岛素。
2、在小动物基因敲除方面，通过体外合成cas9和gRNA RNA，然后注射到受精卵中实现。对于大动物，先在原代细胞中进行基因敲除，再通过克隆技术将敲除的细胞核移植到去核卵细胞中，形成基因敲除的后代。植物基因敲除也有成功案例，但需要特定的表达载体和利用微生物的NHEJ修复机制。
3、利用CRISPR/Cas9系统进行基因敲除，主要通过设计特定的引导RNA（gRNA），使其能够精确地与目标基因的编码区结合。这一过程涉及以下几个步骤：首先，需要选择一个合适的靶点，确保gRNA能够特异性地识别并结合到目标基因的序列上。
4、慢病毒感染：这是首选方法，但有容量限制，适合小型基因。慢病毒的WPRE元件可能导致部分基因翻译受阻。 转座子介导：转座子系统对基因大小无严格限制，但需要高效率转染，尤其对难转染细胞有限制。SB100X转座酶的改进简化了操作，但对设备要求较高。
细胞生物学前沿知识有哪些?
CRISPR-Cas9技术：CRISPR-Cas9技术是一种基因编辑技术，可以针对特定DNA序列进行准确且高效的切除、修复或替换。这种技术已经被广泛应用于细胞和基因治疗领域。
分子生物学则侧重于细胞内的分子层面，研究DNA、RNA和蛋白质的合成、修饰和调控。分子生物学揭示了遗传信息如何从DNA传递到RNA，再到蛋白质，这一过程被称为中心法则。分子生物学的研究还包括细胞信号传导通路，这些通路控制细胞的生长、分化和死亡。
细胞信号转导和细胞通信的探究：细胞间的通信和信号转导是细胞生物学的重要研究领域。随着对这一过程的深入理解，我们可以更好地解释多种生理和病理过程，为疾病的治疗提供新思路。
在显微水平上，细胞生物学关注的是细胞的整体形态和结构，包括细胞膜、细胞核、细胞器等组成部分。而在亚显微水平上，则更加深入地研究细胞内部的精细结构，如细胞器的形态和功能。
细胞生物学研究的是细胞作为生命的基本单元，它不仅关注细胞的整体结构与功能，还深入探讨细胞的亚显微结构以及分子层面的细节。这一学科采用动态视角，追踪细胞及细胞器的生命历程，揭示其生活周期中的各种活动规律。
前沿生物的主要内容 生物学基础知识：前沿生物包括了传统的生物学知识，如细胞生物学、分子生物学、遗传学等。这些基础知识为理解更复杂的前沿生物问题提供了基础。 生物技术进展：前沿生物关注生物技术的最新进展，包括基因编辑技术、合成生物学、生物信息学等。