小鼠组织放在四度几个小时蛋白质会降解吗
1、如果将小鼠组织放在四度过夜，其蛋白质和RNA可能会发生降解。 在提取总蛋白质时，为了抑制蛋白质降解，需要添加蛋白酶抑制剂和裂解液。 通常情况下，裂解液与组织的比例为1：1进行配制。 我们使用的裂解液是RIPA。 将组织用液氮研磨至碎末后，按照一定比例加入裂解液。
2、小鼠组织室温放过夜，蛋白和rna都降解了 提取总蛋白需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1：1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。 将组织用液氮研磨碎了，然后按量加入裂解液，细胞量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟（间断摇动）。然后4摄氏度离心12000rpm，15分钟。
3、第一种：钢锅解冻。方法简单，就是准备一个钢锅，先放在火上预热，只要是温热的状态就好了，然后将锅底朝上，冻肉放上锅底上，再盖上锅盖，这样不到五分钟，就能迅速解冻了，这个方法不仅快，而且肉质鲜美。第二种：纸巾米酒解冻。
4、温 度 鼠鼠生活的理想温度是20~28度，但不代表在这范围内怎么变化都没关系 ，比如说早上和傍晚的温度是20度而中午的温度是28度的话，对鼠鼠来说是不好的。因为鼠鼠对于温度的变化很敏感，身体可能因而受不了，所以饲养环境的周围温度尽可能维持一定的温度。
5、一包泡面的危害是不容小觑的。一包方便面含盐约6克，而一个人一天食盐的摄取量以6克为宜，所以方便面含盐量明显偏高。经常吃方便面会因摄入食盐过多而易患高血压，且损害肾脏。
6、~3年。仓鼠平均寿命2～3年，公婆类仓鼠能活3～5年，最多不超过5年。在饲养仓鼠的过程中，需在笼舍内安装跑轮，给一定的运动量。饲养密度不宜过大，笼舍中饲养最多不超过3只。需喂食专业的鼠粮作为主食，在此基础上，搭配瓜子、花生、坚果等食物。
如何一步同时提取细胞的总RNA和总蛋白?
用sigma公司的trizol试剂（学生，非广告），研磨、裂解、离心之后，RNA在上层，DNA在中层，蛋白质在下层（不同层次的颜色不同，可以很容易分辨），然后分别沉淀。可能存在的问题就是物种不同，效果会后差异，DNA层去除对操作有一定的要求，所用的工具必须是去核酸酶、去蛋白酶之后的。
水溶液提取法：稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解 度大，是提取蛋白质最常用的的溶剂，操作相对麻烦，重复性一般；2 有机溶剂提取法；3 离心管柱提取法：超快速，易用，高产及重复性强；4 通过层析或电洗脱法制备目的蛋白。
首先你确定拿到了这两种细胞系，通过PCR反应证明一个是野生型一个是突变型，即snp。然后用试剂盒提取RNA，设计引物，采用半定量或绝对定量的方法，测定mRNA表达水平；然后另取细胞裂解，提取总蛋白，用特异性抗体检测蛋白表达量。
Dot-Northern杂交是将总RNA提取物经多孔过滤进样器直接转移到杂交膜上，其余步骤与Northern杂交相同。Northern杂交对细胞中低丰度的mRNA检出率较低。外源基因翻译水平上的检测 外源基因翻译水平上的检测通常用Western杂交（Westernblotting）。
