过滤除菌原理是利用微生物不能透过滤膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔径滤膜,是用于压缩空气、酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌。
二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。
酶是很容易变性的,即使不便性也只能在很严格的最适环境下才能发挥最大效力。BUFFER就是为了防止酶变性同时提供使酶发挥最大效力的各种离子的浓度,使酶活性最大。
戊二醛交联法 戊二醛是一种双功能团试剂,它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接加入酶与抗体的混合物中,反应后即得酶标记抗体。
1、在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量、浓度越大:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃酶活力的度量单位。三者之间相互独立。酶活性越高,没有什么内在联系。
2、但这种酶活力单位只在生产化的或者提纯的酶中使用。
3、酶的活性几乎都是用反应情况决定的,只是含量,好像真的不够 因为有时酶含量高,但是活力却很低吧 酶活力单位(U,active unit):酶活力单位的量度。
4、底物浓度的单位:KM。底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,经酶作用可形成产物。 底物浓度是指实验反应物的浓度 。 比如淀粉酶分解淀粉 淀粉溶液的浓度就是指底物浓度。
5、酶有很高的催化效率,在温和条件下(室温、常压、中性)极为有效,其催化效率为一般非生物催化剂的109~1012倍。
试剂:1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。(3)方法:常用方法有三种;1)菌落法:直接滴加试剂于被检菌菌落上。2)滤纸法:取洁净滤纸一小块,沾取菌少许,然后加试剂。
试剂:盐酸四甲基对苯二胺1g,水100ml(贮存于褐色瓶中,冰箱中保存2周)方法:(1) 取一条滤纸,沾取试验菌的菌落少许。
牛肉膏,0.5%;蛋白胨,1%;葡萄糖,0.5%;氯化钠,0.5%。pH0~2,121℃灭菌20min。固体斜面培养基在液体培养基的基础上添加2%的琼脂。
【答案】:A 氧化酶试验试剂:1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。